多肽有著很多特性,關(guān)于一些特殊肽您需要的有關(guān)信息可與博奧森公司的技術(shù)人員聯(lián)系。當(dāng)然首先建議您用少量肽來試驗(yàn)最適合的溶解方法,當(dāng)多肽完全溶解后,才能加緩沖液(注意:應(yīng)將多肽加入到適當(dāng)溶劑中攪拌)。
一、凍干多肽的溶解
1、多肽溶解的主要問題是二級(jí)結(jié)構(gòu)的形成。雖然疏水肽鏈二級(jí)結(jié)構(gòu)的形成更明顯,但除最短的肽鏈外,此現(xiàn)象產(chǎn)生在幾乎所有肽鏈,與極性無關(guān)。所以,溶解多肽的第一個(gè)原則是使用無菌蒸餾水或去離子水,當(dāng)然無氧水最好。多肽溶液可能遇到細(xì)菌降解,為防止此情況的發(fā)生,應(yīng)溶解在無菌的蒸餾水中或用0.45或0.2孔徑的濾膜過濾除菌。含有Cys、Met、Trp的多肽很容易氧化,應(yīng)溶于無氧的水中,無氧水可通過注入惰性氣體(氮、氦、氬)減壓除氣得到;
2、若多肽不溶于純水,超聲處理有助于打碎顆粒并增加溶解度。注意:超聲處理會(huì)引起溶液發(fā)熱或多肽降解;
3、若多肽含有多個(gè)堿性氨基酸,使用(1-10%)的乙酸水溶液:對(duì)于疏水性強(qiáng)的多肽,應(yīng)使用50%的乙酸;
4、若多肽中含有大量酸性氨基酸,可用氨溶液(1-10%)或乙酸乙基嗎啡或重碳酸鹽等揮發(fā)性的堿性緩沖液溶解。pH值在層析前必須調(diào)整;
5、異丙醇和乙腈能溶解中等大小的多肽。若肽要上柱,有機(jī)溶劑的量必須很少否則將嚴(yán)重影響停留時(shí)間;
6、若多肽因含有Val、Leu、Met、Phe、Tyr、Ala等芳香鏈而高度疏水、或?yàn)橹行噪臅r(shí),DMF或DMSO等膜變性劑的使用,有利于多肽的溶解:
a.高濃度模變性劑通過破壞多肽的二級(jí)結(jié)構(gòu)而助溶;
b.膜變性劑適于多肽分析液的制備,但可能會(huì)對(duì)其生物活性的研究工作造成干擾;
c.DMF是最佳變性劑(最高濃度可達(dá)30%),滴加至多肽溶解;
d.反相層析法時(shí),DMF將與洗脫液前鋒一起流出,根據(jù)入量的多少,峰值可能很高。大多數(shù)肽能在大量DMF流出后幾分鐘內(nèi)流出,若肽鏈很小,洗脫太早,多肽的量將很低。
二、凍干多肽的保存
標(biāo)有“凍干保存”說明的多肽應(yīng)該保存在冰凍條件下,以-20℃以下最佳,其活性可保持多年。當(dāng)使用干凍產(chǎn)品時(shí),開蓋前其容器應(yīng)在裝有新鮮干燥箱內(nèi)升至室溫。-20℃的產(chǎn)品,此過程需要一小時(shí)或更長,隨保裝而定。否則,當(dāng)容器打開,水氣進(jìn)入導(dǎo)致凝縮而降低穩(wěn)定性。一旦打開,應(yīng)迅速稱量完畢,立即封閉以免潮解,親水肽更應(yīng)注意。
三、溶解多肽的保存
多肽溶液比干粉的穩(wěn)定性差很多,為了獲得較好的效果,遵循以下原則:
1、分成小包裝避免反復(fù)凍融。使用多少解凍多少;
2、溶于pH5-7無菌的緩沖液中,-20℃儲(chǔ)存;
3、由于細(xì)菌能降解多肽,儲(chǔ)存前應(yīng)過濾細(xì)菌;
4、包含Cys、Met、Try、Glu、Asp的多肽易于氧化,因此應(yīng)保存在無氧化劑的環(huán)境中。
| 亚洲第一成人无码A片 | 精品国产鲁一鲁一区二区张丽 | 国产精品久久久久久久久在线观看 | 四川少妇BBB搡BBB爽爽爽视頻 | 亚洲无 码A片在线观看 | 日本免费三 片免费观看 | 无码人妻丰满熟妇bbbb | 国产精品高潮呻吟 | 精品一区二区三区酒店 | 清纯唯美美腿丝袜国产精品一区 | 欧美国产一区二区三区 | 国产又粗又黄又爽又硬 | 午夜免费视频久久久久 | 1000部毛片A片免费视频 | 中文字幕永久在线视频 | 美女很黄很黄的免费网站 | 四川省丰满少妇一级毛片 | 午夜理理伦电影A片朋友夫妇 | 美女黄色视频免费观看 | 美女自慰喷水高清免费网站 | 国产精品亚洲成在人线 | 国产精品aⅴ久久久久久鸭绿欲 | 亚洲欧美成人综合久久久﹣真实国产乱… | 国产精品爽爽久久久久久蜜臀 | 亚洲秘 无码一区二区三区电影 | 黑人巨粗进入疼哭A片 | 久久国产乱子伦精品一区二区小说 | 精品久久久久久久久久久久无码免费 | 高清无码在线观看视频黄 | 在线观看亚洲视频 | 国产91无码精品秘 入口、 | 东北少妇BBBB搡BBB搡 | 寡妇高潮一级毛片免费看 | 黄色同房视频免费观看 | 7777kkk亚洲综合欧美网站 | 国产精品无码免费在线 | 无码免费一区二区三区动漫 | 人妻少妇嫩草被猛烈进入无码蜜桃 | 人人妻人人澡人人精品 | 四季Av夜夜嗨噜噜噜蜜臀 |