發(fā)表者：北京博奧森生物      發(fā)表時間：2016-2-15

流式細胞檢測標本樣品的制備方法（供參考） 1 目標細胞原本就處于單細胞狀態(tài)，如單細胞懸液制備就比較簡單。 2 目標細胞來源于外周血（PBMC，外周血單核細胞），用FICOLL密度梯度離心，單個核細胞再用PBS洗滌重懸即可。 3 目標細胞來源于胸水、腹水、腦脊液等，只要將各種體液離心沉淀，PBS洗滌幾次，用濾網(wǎng)過濾即可。 4 目標細胞是體外培養(yǎng)的細胞，若為懸浮細胞，直接收集即可。 5 目標細胞若是貼壁細胞，用胰酶消化后收集即可。 6 目標細胞是免疫器官內(nèi)的細胞：如骨髓、胸腺、脾、淋巴結(jié)等，由于這些組織器官主要有免疫細胞組成，細胞與細胞之間的緊密接觸很少，而且其中含有的纖維結(jié)締組織較少，所以可以直接采用機械研磨法得到單細胞懸液。 7 骨髓比較特殊，其組織疏松，使用研磨法磨碎，然后用濾網(wǎng)過濾一次就可以得到單細胞懸液。注意：研磨棒與組織接觸的部位不要太硬，最好是有一定彈性的橡膠（如注射器的內(nèi)芯），同時研磨時不要太用力，否則得到的單細胞懸液含有很多死細胞和細胞碎片，影響實驗結(jié)果。 8 目標細胞來自實體器官，如肺、肝臟等，可用酶消化法得到單細胞懸液。將實體臟器用剪刀剪成細小碎片，加入用于消化的IV型膠原酶，置于37℃孵箱中消化，消化的時間根據(jù)臟器的不同而定，然后用研磨棒磨碎過濾即可得到單細胞懸液。 9 腫瘤組織也可采用上述方法。